规格： 切片 β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子，通过原位染色，在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。

实验步骤：

1. 用 2 mL D-PBSA 液洗涤细胞（如在 6 孔培养板上）。

2. 用 1 mL 固定液于室温下固定细胞 5 min。

3. 用 2 mL D-PBSA 洗涤细胞 2 次。

4. 将 1 mL 底物/染色液加入到每个培养孔内，37℃ 孵育 2 h。

5. 用 2 mL D-PBSA 液冲洗每孔细胞，在倒置显微镜下观察细胞，计数蓝染（β-gal 阳性）细胞。

6. 培养板的储存。在每孔加 1 mL 含 10% 甲醛的缓冲盐溶液，室温下固定 10 min，然后用缓冲盐溶液洗涤细胞，4℃ 储存 缓冲盐溶液。

结果展示：

被β半乳糖苷酶法染色的衰老细胞

注意事项：

1.  β-Gal Fixative有一定的腐蚀性和气味，操作时请注意防护。

2. β-半乳糖苷酶染色反应依赖于特定的pH条件，不能在二氧化碳培养箱中进行染色反应。用于细胞培养的二氧化碳培养箱 中较高浓度的二氧化碳会影响染色工作液的pH值，而导致染色失败。

3.  配制染色工作液时需使用聚丙烯（polypropylene）容器或玻璃容器，不宜使用聚苯乙烯（polystyrene）容器。但染色时 可以在聚苯乙烯（polystyrene）容器中进行，例如普通的6孔板就可以用作染色的容器。

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